{"id":1418589,"date":"2022-03-01T12:00:09","date_gmt":"2022-03-01T11:00:09","guid":{"rendered":"https:\/\/staging-wp-int.laboklin.com\/asthma-in-horses-tips-and-tricks-for-a-meaningful-cytological-diagnosis\/"},"modified":"2024-09-05T13:17:57","modified_gmt":"2024-09-05T11:17:57","slug":"asthma-in-horses-tips-and-tricks-for-a-meaningful-cytological-diagnosis","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/laboklin.com\/it\/asthma-in-horses-tips-and-tricks-for-a-meaningful-cytological-diagnosis\/","title":{"rendered":"Asma nei cavalli: consigli e trucchi per una diagnosi citologica significativa"},"content":{"rendered":"

[vc_row][vc_column width=”2\/3″][vc_column_text]La valutazione delle malattie respiratorie degli equini si basa sull’anamnesi, sull’esame clinico, sui reperti endoscopici e sui test di funzionalit\u00e0 polmonare; inoltre, gli esami di laboratorio, come la citologia del materiale campionato dalle vie respiratorie (TBS – secrezione tracheobronchiale e BAL – lavaggio broncoalveolare), sono anch’essi elementi importanti nel processo diagnostico. Come sempre, il valore dei test di laboratorio rimane invariato con la selezione del materiale adatto e la sua preparazione ottimale.<\/p>\n

L’esame TBS e\/o BAL \u00e8 indicato per i classici segni delle malattie delle vie respiratorie come tosse, suoni respiratori patologici, secrezione nasale e dispnea. Tuttavia, anche l’intolleranza all’esercizio \u00e8 una delle indicazioni<\/strong> poich\u00e9 i segni clinici possono essere molto sottili, specialmente nell’asma equina da lieve a moderata (precedentemente: Malattia infiammatoria delle vie aeree (IAD)).<\/p>\n

La raccolta di TBS e BAL<\/strong> \u00e8 stata recentemente descritta in dettaglio da Schwarz e K\u00fchn con utili suggerimenti per l’applicazione pratica.<\/p>\n

Ma quando \u00e8 preferibile esaminare il TBS e quando \u00e8 meglio il BAL? Qual \u00e8 il significato dei risultati ottenuti dai diversi materiali raccolti? Idealmente, si dovrebbero prelevare entrambi i campioni. Per gli esami batteriologici \u00e8 preferibile il materiale tracheale, quindi se si sospettano malattie batteriche (es. febbre) si dovrebbe sempre prendere il TBS. Il BAL \u00e8 controindicato nella sospetta polmonite batterica. Tuttavia, il BAL \u00e8 molto pi\u00f9 adatto per l’esame citologico perch\u00e9 i suoi risultati si correlano meglio con la fisiopatologia rispetto a quelli di TBS. Inoltre, poich\u00e9 il quadro citologico del TBS non \u00e8 rappresentativo delle vie aeree pi\u00f9 profonde, il BAL \u00e8 il metodo di scelta per lo studio citologico delle malattie polmonari diffuse.<\/p>\n

La corretta preparazione del campione \u00e8 fondamentale per una diagnosi di successo tanto quanto la raccolta del campione. Sfortunatamente, le cellule degenerano molto rapidamente nei liquidi di lavaggio. Pertanto, anche se i campioni vengono inviati a un laboratorio per la valutazione, la preparazione citologica deve essere eseguita immediatamente dal campione di materiale appena ottenuto. Se gli strisci vengono effettuati solo in laboratorio, le cellule spesso non possono pi\u00f9 essere valutate dopo solo poche ore di trasporto \/ conservazione e il significato dei risultati citologici diminuisce rapidamente.<\/p>\n

Se il TBS<\/strong> pu\u00f2 essere ottenuto senza lavaggio<\/strong>, gli strisci vengono preparati direttamente dal muco. A tale scopo, una goccia di campione viene posta su un vetrino da microscopio, un secondo vetrino viene posizionato sopra di esso senza pressione e trascinato rapidamente sopra il primo, oppure entrambi i vetrini vengono distanziati in direzioni opposte in modo da distribuire il materiale del campione sul vetrino \u201ccome il burro su una pagnotta\u201d (Fig. 1<\/strong>). Se il TBS<\/strong> \u00e8 stato ottenuto mediante lavaggio<\/strong>, il materiale viene prima centrifugato a bassa velocit\u00e0 (200\u2013300 g), poi il liquido viene decantato e infine si deposita una goccia di muco sedimentato come descritto sopra.<\/p>\n

Il BAL<\/strong> \u00e8 sempre povero di cellule, quindi \u00e8 necessario effettuare preparativi di arricchimento per la valutazione citologica. Il metodo pi\u00f9 semplice consiste nell’eseguire strisci di sedimenti: una parte del campione viene centrifugata a bassa velocit\u00e0, analogamente ai campioni di lavaggio tracheale e il surnatante viene ampiamente decantato. Il pellet cellulare viene risospeso con il resto del liquido e distribuito utilizzando la tecnica dello striscio di sangue. Una leggera goccia di sospensione viene posta su un’estremit\u00e0 di un vetrino. Un secondo vetrino viene posizionato davanti alla goccia con un angolo di circa 45\u00b0 e lo si sposta verso la goccia fino a quando il liquido non diffonde su tutto il bordo. Infine, si distribuisce il campione sul vetrino spingendo il vetrino in avanti vigorosamente e in modo uniforme. I preparati di altissima qualit\u00e0 per la valutazione dei fluidi poveri di cellule sono prodotti dalla citocentrifugazione. Per alcune centrifughe sono disponibili inserti speciali per questo scopo, ma vale la pena acquistarli solo se usati frequentemente. Tuttavia, \u00e8 anche possibile costruire una \u201ccamera di sedimentazione\u201d fatta in casa (Fig. 2<\/strong>): una siringa da 2 ml viene premuta saldamente su un vetrino, coperto da una carta da filtro con un foro della stessa dimensione proprio all’apertura della siringa, con robusti morsetti. Il materiale del campione viene versato attraverso il cono della siringa. La carta da filtro assorbe lentamente il liquido, arricchendo il campione di cellule nell’area del foro del vetrino. Per evitare la moltiplicazione in vitro dei batteri, la camera deve essere conservata in frigorifero durante la sedimentazione.<\/p>\n

\u00c8 fondamentale asciugare i preparati il pi\u00f9 rapidamente possibile per preservare le cellule. Soprattutto con materiale viscoso, il processo di essiccazione pu\u00f2 essere accelerato ponendo gli strisci in un’incubatrice o su una superficie calda. \u00c8 anche possibile un’attenta asciugatura con aria tiepida. Per la spedizione a un laboratorio, i vetrini asciutti e non colorati sono imballati in scatole di spedizione, aliquote rappresentative dei campioni raccolti sono racchiuse in provette ermeticamente sigillate e non rivestite. Il materiale del campione liquido deve raggiungere il laboratorio il pi\u00f9 rapidamente possibile e refrigerato (possibilmente aggiungere un siberino).<\/p>\n

Le preparazioni possono essere colorate con coloranti rapidi<\/strong> commerciali tipo Romanowsky, ma almeno uno striscio deve essere colorato con un colorante specifico per i granuli dei mastociti, come il blu di toluidina.<\/p>\n

Questi granuli sono facilmente rilevabili nei campioni delle vie respiratorie, sebbene siano diagnosticamente molto significativi (Fig. 4<\/strong>). Il pattern cellulare fisiologico<\/strong> di TBS e BAL riflette la struttura anatomica delle rispettive sezioni del tratto respiratorio. Negli animali sani, gli strisci citologici sono poveri di cellule, con poche cellule tissutali (epitelio ciliato e cellule caliciformi, fig. 3<\/strong>) e un piccolo numero di cellule infiammatorie (principalmente macrofagi e linfociti, meno neutrofili, eosinofili e mastociti, fig. 4<\/strong>). Una panoramica della composizione cellulare di TBS e BAL nei cavalli asintomatici \u00e8 mostrata nella tabella 1<\/strong>.[\/vc_column_text][\/vc_column][vc_column width=”1\/3″][vc_column_text]<\/p>\n\n\t\t\t