{"id":1417596,"date":"2022-10-13T16:13:18","date_gmt":"2022-10-13T14:13:18","guid":{"rendered":"https:\/\/staging-wp-int.laboklin.com\/imha\/"},"modified":"2024-09-05T11:03:31","modified_gmt":"2024-09-05T09:03:31","slug":"imha","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/laboklin.com\/it\/imha\/","title":{"rendered":"Quali test possono aiutarmi a diagnosticare un’anemia emolitica immuno-mediata (IMHA) e quali campioni devo prelevare?"},"content":{"rendered":"

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Quando sospettare l’emolisi?<\/h2>\n

Sospettiamo l’emolisi soprattutto nell\u2019anemia rigenerativa, quando \u00e8 stata esclusa la perdita di sangue (fig. 1).<\/p>\n

Nella maggior parte dei casi, l’anemia emolitica \u00e8 grave e mostra segni di rigenerazione pi\u00f9 forti rispetto all’anemia da perdita di sangue. In caso di emolisi, gli eritrociti vengono distrutti. Oltre all’IMHA primaria (indicata come IMHA non associativa), molte altre patologie sottostanti possono causare emolisi (fig. 2).<\/p>\n

Quali test devono essere eseguiti?<\/h2>\n

Il materiale richiesto per la diagnosi di IMHA \u00e8 elencato nella fig. 3.<\/p>\n

Emocromo\/citomorfologia (striscio di sangue)<\/strong>: fornisce informazioni sulla rigenerazione ed \u00e8 utile come prima panoramica, ad es. per rilevare agenti infettivi.
\nLa morfologia degli eritrociti pu\u00f2 anche fornire informazioni importanti sulla causa dell’anemia. In Laboklin, la conta reticolocitaria \u00e8 inclusa in ogni emocromo di cane e gatto. L’emocromo deve essere misurato su sangue in EDTA il prima possibile dopo il prelievo, poich\u00e9 la fragilit\u00e0 eritrocitaria dei cani con IMHA \u00e8 aumentata.<\/p>\n

Chimica del sangue<\/strong>: la misurazione della bilirubina sierica e delle proteine totali per identificare la causa dell’anemia pu\u00f2 aiutare a differenziare emolisi ed emorragie.<\/p>\n

Analisi delle urine<\/strong>: in alcuni casi di emolisi possono essere presenti bilirubinuria o emoglobinuria. Da notare che nei cani, specialmente nei cani maschi, un risultato del test debolmente positivo pu\u00f2 essere fisiologico.<\/p>\n

Agenti infettivi<\/strong>: per rilevare agenti infettivi come la babesia e il micoplasma emotropo nelle fasi acute, si raccomanda l’analisi molecolare (PCR). Inoltre, dovrebbero venire esclusi agenti patogeni come ehrlichia e anaplasma.
\nPer l’ehrlichia, pu\u00f2 essere utile un’ulteriore determinazione del titolo anticorpale.<\/p>\n

Test per diagnosticare la distruzione immunomediata<\/h2>\n

Sferociti<\/strong>: la presenza dei cosiddetti sferociti (fig. 4) nello striscio di sangue pu\u00f2 fornire preziose informazioni su una distruzione immunomediata degli eritrociti. Il materiale da campionare richiesto per il loro rilevamento \u00e8 di due – tre strisci di sangue <\/strong>preparati direttamente dopo il prelievo.<\/p>\n

Autoagglutinazione<\/strong>: osservando il campione in EDTA, si pu\u00f2 notare la presenza di un’autoagglutinazione non specifica. Questo risultato dovrebbe essere seguito da un test di agglutinazione salina e da un test di Coombs.<\/p>\n

Test di Coombs<\/strong>: adatto a rilevare la presenza di autoanticorpi sulla superficie degli eritrociti. Materiale da prelevare: sangue fresco in EDTA<\/strong>. Se il campione viene conservato refrigerato, il test pu\u00f2 essere valutato fino a 5 giorni dal prelievo.<\/p>\n

Domande frequenti sulla valutazione del test di Coombs<\/h2>\n

Qual \u00e8 il principio del test di Coombs?<\/strong><\/p>\n

Il test di Coombs, chiamato anche DAT (Direct Antiglobulin Test), verifica la presenza di anticorpi sulla superficie dei globuli rossi (fig. 5).<\/p>\n

Sul mercato sono disponibili diversi metodi di test: gel test, strip test, test di citometria a flusso, il noto test su micropiastra e altro ancora.<\/p>\n

Tutti i test menzionati sono adeguati per la diagnosi di IMHA nell’uomo e nel cane. Alcuni test sono disponibili in commercio anche per gatti e cavalli.<\/p>\n

Qual \u00e8 il principio del metodo della micropiastra?<\/strong><\/p>\n

In medicina veterinaria, la micropiastra \u00e8 il metodo pi\u00f9 utilizzato. L’antiglobulina (reagente di Coombs) viene gradualmente diluita (1:2, 1:4, 1:8, 1:16, ecc.), quindi vengono aggiunti eritrociti lavati e incubati per almeno 30 minuti.<\/p>\n

Se non si verifica alcuna reazione, le cellule del sangue sedimenteranno sul fondo dei pozzetti e dopo l’incubazione si osserver\u00e0 solo un minuscolo punto rosso: il test sar\u00e0 negativo.
\nSe il test \u00e8 positivo, le antiglobuline aggiunte legano gli eritrociti impedendo loro di cadere sul fondo del pozzetto. Gli eritrociti ricoprono completamente o quasi il pozzo.
\nSe solo i primi due pozzetti (1:2 e 1:4) mostrano positivit\u00e0, il test \u00e8 ancora considerato negativo, perch\u00e9 questi titoli bassi sono considerati aspecifici. I titoli da 1:8 in su sono considerati positivi. Non \u00e8 raro vedere titoli superiori a 1:1024 in caso di IMHA.<\/p>\n

Che cos’\u00e8 un effetto prozona?<\/strong><\/p>\n

L’effetto prozona \u00e8 un fenomeno osservato in campioni altamente positivi. L’alta concentrazione di anticorpi anti- eritrociti inibisce la reazione positiva. Un esempio \u00e8 illustrato di seguito (fig. 6).<\/p>\n

Il campione di sangue EDTA presenta un coagulo di sangue, il test di Coombs \u00e8 in grado di superarlo?<\/strong><\/p>\n

Sfortunatamente no. La presenza di globuli rossi intatti \u00e8 indispensabile per l’esecuzione di un corretto test di Coombs. Tuttavia, \u00e8 importante conoscere la differenza tra un coagulo di sangue e un’agglutinazione. Il coagulo di sangue \u00e8 il risultato della coagulazione fisiologica, e pu\u00f2 verificarsi quando il campione non \u00e8 miscelato correttamente con l’anticoagulante EDTA. Il coagulo di sangue \u00e8 irreversibile. Per evitare ci\u00f2: dopo il campionamento, capovolgere delicatamente e ripetutamente il campione. L’agglutinazione pu\u00f2 essere causato da diversi fattori. Nella maggior parte dei casi, l’agglutinazione \u00e8 reversibile, ad es. riscaldando il campione in mano o lavando le cellule.[\/vc_column_text][\/vc_column][vc_column width=”1\/3″][vc_column_text]<\/p>\n\n\t\t\t